四川麦冬多糖的微波提取
[行业新闻] 发布时间:2017-11-11 14:48:58 浏览次数:1318
应用微波技术, 采取L9( 34) 正交优化实验, 研究了提取时间、微波功率和液固质量比对四川麦冬多糖含量的影响。结果表明, 微波提取四川麦冬多糖最优工艺条件为: 提取时间20min, 微波功率700W, 水与四川麦冬液固质量比60∶1。
四川麦冬为百合科植物麦冬(Ophiopogonjaponicus( Thunb.)Ker- Gawl.) 的干燥块根, 是常用滋阴中药及著名古验方———生脉散的三味主药之一。在我国, 麦冬有杭、川、湖北、福建等主流商品, 其中四川麦冬是川产地道中药材, 主产地在四川绵阳、三台。研究发现, 四川麦冬含有甾体皂苷、高异黄酮、多糖、氨基酸等成分。多糖作为生物体主要生理活性成分之一, 具有抗心肌缺血、抗过敏、降血糖、耐缺氧、增强机体免疫等多种功能。多糖的提取方法有多种, 包括水浸醇沉法、稀酸法、稀碱法、超声法、微波法和酶法,麦冬多糖的提取目前主要是水浸醇提法, 未见用微波提取的报道。利用微波加热提取多糖, 能较大程度地提高多糖提取率。本研究在微波单因素实验基础上, 对影响四川麦冬多糖含量的主要因素进L9( 34) 正交实验, 以期找出微波法提取四川麦冬多糖的最佳工艺条件, 为四川麦冬多糖理化性质及结构鉴定奠定基础。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
四川麦冬和四川麦冬苗购于绵阳玉森麦冬开发有限责任公司; 葡萄糖、蒽酮、浓硫酸、无水乙醇等均为分析纯。WD700TL17 - 3 微波炉广州格兰仕; DHG-9070A 电热恒温鼓风干燥箱上海齐欣科学仪器有限公司; 201D- II 旋转蒸发器郑州长城工贸有限公司; 752 型紫外可见分光光度计上海光谱仪器有限公司; SHB- 3 循环水多用真空泵郑州杜甫仪器厂。
1.2 实验方法
1.2.1 制作标准曲线精密称取干燥恒重的葡萄糖适量, 加水溶解使成230.0mg/L, 精密量取0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL 置具塞试管内, 加水至1.0mL, 加入新鲜配制的蒽酮试剂( 0.2%蒽酮的80%硫酸溶液)8.0mL, 至沸水浴加热10min 后, 迅速置冰水浴冷却10min, 以首管为空白, 在波长为626nm 测定吸光度。以葡萄糖浓度为横坐标, 吸光度为纵坐标得标准曲线。
1.2.2 样品含量测定吸取样品液1.0mL ( 相当于10ug 左右的多糖) , 按1.2.1 中的步骤操作, 测吸光度, 以标准曲线计算多糖含量。
1.3 四川麦冬多糖提取工艺
1.3.1 四川麦冬粗多糖提取工艺称取一定量的四川麦冬粉末置于烧杯中, 按设定的液固质量比加入水, 在特定的功率下微波辐射90s, 取出冰水降温至0℃, 再继续辐射90s, 如此反复直至达到预定的提取时间。提取液经抽滤、稀释后按1.2.2 方法操作, 626nm 处测定吸光度。
1.3.2 四川麦冬多糖精制工艺称取一定量的四川麦冬粉末, 在正交实验最优水平的基础上微波浸提, 抽滤,滤液经活性碳脱色、Sevag 法除蛋白、减压浓缩后, 加入无水乙醇使含醇量达80%, 冰箱静置过夜, 过滤,沉淀用无水乙醇、乙醚、丙酮洗涤数次, 60℃烘干, 即得麦冬多糖精制品。
2 结果与分析
2.1 葡萄糖含量测定的标准曲线由可见, 葡萄糖浓度在2.56～25.6mg/L 范围内, 呈良好的线性关系。
2.2 微波提取的单因素实验
2.2.1 提取时间对四川麦冬多糖含量的影响实验设定微波功率为406W, 液固质量比为50∶1, 研究不同的微波提取时间对多糖含量的影响, 结果。由图2 可见, 在一定范围内, 随着提取时间的延长, 多糖含量增加, 并在15～20min 时达到最大, 之后继续延长提取时间, 多糖含量有下降趋势, 可能是较长时间的微波辐射使多糖的稳定性下降, 从而影响
其含量, 所以微波提取时间不宜过长, 以15～20min为宜。
2.2.2 微波功率对四川麦冬多糖含量的影响实验设定
微波提取时间为15min, 液固质量比为50∶1, 研究不同的微波功率对麦冬多糖含量的影响, 结果见图3。由图3 可知, 随着功率的增加, 多糖含量也呈增加趋势, 在功率达到700W时, 多糖含量也达到最大,
若继续增加功率, 多糖含量可能仍会增大, 但由于实验微波设备的限制, 功率只能达到700W, 所以选择微波功率为700W。
2.2.3 水与四川麦冬的液固质量比对麦冬多糖含量的
影响实验设定微波提取时间为15min, 微波功率为700W, 研究不同的液固质量比对四川细叶绿化麦冬多糖含量的影响, 结果见图4。由图4 可知, 随着液固质量比的增加, 多糖含量呈先增加而后平缓趋势, 故最佳液固质量比为50∶1～60∶1。
2.3 微波提取工艺的正交实验
在微波提取单因素实验的基础上, 对影响四川绿化麦冬多糖含量的主要因素( 提取时间、液固质量比和微波功率) 进行L9( 34) 正交实验, 因素水平见表1, 结果见表2, 方差分析见表3。从表2 的分析结果可知, 各因素对四川麦冬草多糖含量影响的主次顺序为A>C>B; 优水平为A3B3C3, 即提取时间20min, 微波功率700W, 水与川麦冬液固质量比60∶1。从表3 的方差分析可知, FA=250.9286>99, FC=187.6429>99, FB=52.0714>19, 表明提取时间、液固质量比对四川麦冬苗多糖含量均有显著影响, 而微波功率对多糖含量具有较显著影响。
2.4 四川麦冬药材多糖提取率的测定
将川麦冬多糖精制品重新溶解, 测糖, 计算得四川麦冬多糖提取率为8.20%。
3 结论
综上所述, 采用微波技术, 从四川麦冬中提取多糖的最适条件为: 提取时间20min, 微波功率700W, 水与四川麦冬液固质量比60∶1, 提取率为8.20%。
